转基因技术平台
厦门大学实验动物中心转基因平台经过多年的建设,目前已经拥有数百平方米的分子克隆实验室、细胞培养实验室等标准实验室,配有Nikon霍夫曼显微镜、Nikon Ti-s荧光显微镜、Bio-Rad电转仪、Baker生物安全柜、显微注射仪等实验仪器。
平台拥有300多平方米的SPF级小鼠屏障环境IVC笼具饲养区,饲养C57BL/6J、BALB/c、ICR、DBA等种源小鼠2000余笼,实现了转基因操作所有小鼠的全部自行供给。
平台目前已经熟练掌握质粒构建,体外RNA转录,受精卵显微注射,单倍体细胞注射等技术,能够熟练完成从质粒构建到小鼠鉴定整个基因工程小鼠制备流程。
平台已为校内相关课题组制备具有完全知识产权的基因工程小鼠150余株,并向国内外有关单位提供转基因小鼠20余次(株)。
平台本着为广大校内外科研工作者服务的宗旨,向国内外开放,提供比商业公司更灵活、更优质、更优惠的基因工程小鼠制备技术服务,详细收费标准参见下表。
有需求者请联系:贺颖老师 邮箱:hey@xmu.edu.cn 电话:13400666275
项目 | 说明 | 收费(万元) | 耗时(月) | 备注 |
全身敲除小鼠 (KO) |
采用受精卵胞浆注射方式,注射一对(条)gRNA,得到至少一只杂合F0。 | 1.3 | 2 | 关于sgRNA、克隆制备和后期鉴定,平台可以提供质粒模板及技术支持。动物中心网站提供protocol下载。校外机构在校内收费基础上加收30%管理费。此收费标准从2018年10月12日起实行。 |
注射两对(条)gRNA,增加成功率及同样时间内拿到F0的数目 | 1.5 | 2 | ||
平台只负责注射100个卵,仔鼠饲养至出生后21天。其他费用(超时饲养费、打包费等)及操作由课题组自行承担。 | 0.4 | 1.5 | ||
条件性敲除小鼠 (CKO) |
采用单倍体胚胎干细胞的方法,获得至少两只F1母鼠。 | 4 | 6~8 | |
平台只负责cko单倍体胚胎干细胞细胞制备及后期注射和饲养。克隆制备及后期鉴定由课题组自行承担。 | 3 | 4.5 | ||
点突变小鼠 (KI) |
得到至少一只F0,采用受精卵胞浆注射注射方式。 | 3 | 4 | |
平台只负责注射400个卵,仔鼠饲养至出生后21天。gRNA制备和KI 模板构建及后期鉴定由课题组自行承担。 | 1 | 2 | ||
ROSA26条件性过表达或过表达 | 至少得到一只F0,采用受精卵胞浆注射注射方式。 | 3 | 3 | |
大片段基因敲入小鼠,如插入HA,FLAG或GFP等标签 | 采用单倍体胚胎干细胞的方法,获得至少两只F1母鼠。 | 4 | 6~8 | |
平台只负责单倍体细胞制备及后期注射和饲养。克隆制备及后期鉴定由课题组自行承担。 | 3 | 4.5 |